流式細(xì)胞儀作為醫(yī)院日常診療中的診斷輔助工具，在醫(yī)療設(shè)備搬遷過(guò)程中需要特別小心，以確保其搬遷前后的性能不受影響。以下是一套詳細(xì)的流式細(xì)胞儀搬遷調(diào)試方案，旨在指導(dǎo)醫(yī)療設(shè)備搬遷公司能夠安全、高效地完成流式細(xì)胞儀搬遷調(diào)試工作。

流式細(xì)胞儀檢測(cè)的準(zhǔn)確度、精密度、熒光與散射光靈敏度、分辨率是影響流式細(xì)胞分析的重要因素。流式細(xì)胞儀光學(xué)、液流和電子系統(tǒng)的元件損壞或未調(diào)試到最佳狀態(tài)均可導(dǎo)致流式細(xì)胞分析結(jié)果出現(xiàn)偏差甚至錯(cuò)誤。為了使流式細(xì)胞分析結(jié)果準(zhǔn)確、可靠，并且在各實(shí)驗(yàn)室間具有可比性，搬遷完成后應(yīng)對(duì)儀器進(jìn)行校準(zhǔn)，使儀器達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)化。在安裝完成后，對(duì)流式細(xì)胞儀進(jìn)行全面的調(diào)試，包括激光強(qiáng)度、液流速度、測(cè)量區(qū)光路等關(guān)鍵參數(shù)的調(diào)整。調(diào)試過(guò)程中，應(yīng)使用專(zhuān)業(yè)的測(cè)試設(shè)備和工具，確保設(shè)備的性能達(dá)到最佳狀態(tài)。

1、光路校正調(diào)試

光路校正是最關(guān)鍵的校準(zhǔn)，其目的是使樣本流處于激光束的中心，樣本流與激光束發(fā)生相互作用的信號(hào)能夠被靈敏地檢測(cè)，信號(hào)脈沖有最大的幅度和最小的寬度，而且有良好的重復(fù)性。在散射光或熒光直方圖中，峰的高度最高、寬度最窄。使用散射光和熒光均勻的顆粒或微球很容易使流式細(xì)胞儀的光路達(dá)到最佳校正。大多數(shù)微球大小的均勻性比典型細(xì)胞的變異更小，熒光強(qiáng)度的變異系數(shù)較小，一般<2%。光路校正的方法一般是在流式細(xì)胞儀開(kāi)機(jī)并通過(guò)自檢后直接將微球用磷酸鹽緩沖液稀釋并上機(jī)檢測(cè)。

2、熒光靈敏度校準(zhǔn)

流式細(xì)胞儀的熒光靈敏度的概念有兩個(gè)方面的含義:一是儀器能夠檢測(cè)到的最小熒光量，又稱(chēng)為檢測(cè)極限；二是在混合細(xì)胞懸液中能夠分辨出未進(jìn)行熒光染色的細(xì)胞和有弱熒光細(xì)胞的能力，又稱(chēng)為熒光分辨率。兩種儀器可能有相同的檢測(cè)極限，但分辨熒光染色細(xì)胞的能力可有顯著差別。當(dāng)測(cè)量熒光染色細(xì)胞時(shí)，熒光檢測(cè)極限十分重要，所測(cè)定的細(xì)胞數(shù)量越多，平均熒光強(qiáng)度將越準(zhǔn)確和精密。熒光分辨率對(duì)免疫熒光分析最為重要，它可影響到測(cè)定的精密度和有不同熒光染色強(qiáng)度細(xì)胞亞群的區(qū)分。檢測(cè)熒光靈敏度的標(biāo)準(zhǔn)微球可從專(zhuān)業(yè)廠(chǎng)商購(gòu)買(mǎi)。

3、光散射靈敏度校準(zhǔn)

光散射靈敏度通常指在無(wú)顆粒的液體中檢測(cè)到最小顆粒的大小。前向散射光的靈敏度通常受激發(fā)光源產(chǎn)生的光學(xué)噪聲的影響，側(cè)向散射光靈敏度常受到鞘液中亞微米級(jí)顆粒的限制。目前，一般流式細(xì)胞儀的前向散射光靈敏度可達(dá)0.2~05H。用相對(duì)或絕對(duì)光散射強(qiáng)度兩種不同的微球可以作為一種方法校正儀器的光散射。目前，大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室均使用與樣本生物學(xué)特征類(lèi)似的細(xì)胞監(jiān)測(cè)光散射。

4、光電倍增管校準(zhǔn)

流式細(xì)胞儀在使用過(guò)程中，光電倍增管隨時(shí)間的增加，其放大功率會(huì)有所改變，對(duì)樣品檢測(cè)的靈敏度會(huì)產(chǎn)生影響。為保證樣品檢測(cè)時(shí)儀器處于最佳工作狀態(tài)，采用質(zhì)控品進(jìn)行光電倍增管校準(zhǔn)，必要時(shí)進(jìn)行電壓補(bǔ)償。

5、絕對(duì)計(jì)數(shù)的校準(zhǔn)

為保證儀器在計(jì)數(shù)時(shí)的準(zhǔn)確性，儀器應(yīng)采用絕對(duì)計(jì)數(shù)標(biāo)準(zhǔn)品建立絕對(duì)計(jì)數(shù)標(biāo)準(zhǔn)。該標(biāo)準(zhǔn)品是經(jīng)標(biāo)定的，如以計(jì)算1000個(gè)細(xì)胞為1m，作為設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)。在樣本測(cè)定時(shí)以此為標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行絕對(duì)計(jì)數(shù)，從而獲得絕對(duì)計(jì)數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)值。

6、光譜重疊補(bǔ)償

流式細(xì)胞分析中的熒光染色常需要兩種或兩種以上標(biāo)記不同熒光色素的單克隆抗體或不同染料的熒光色素進(jìn)行多色分析。臨床實(shí)驗(yàn)室可以用經(jīng)多色熒光染色后的正常淋巴細(xì)胞作為參考標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行補(bǔ)償校正，根據(jù)儀器設(shè)置的補(bǔ)償電路進(jìn)行自動(dòng)或手動(dòng)的補(bǔ)償，可合理設(shè)置熒光信號(hào)的補(bǔ)償值。

醫(yī)療設(shè)備流式細(xì)胞儀搬遷調(diào)試是一項(xiàng)復(fù)雜而細(xì)致的工作，需要專(zhuān)業(yè)團(tuán)隊(duì)嚴(yán)格遵守設(shè)備的操作規(guī)范和安全規(guī)程。通過(guò)遵循上述方案，可以確保流式細(xì)胞儀在搬遷過(guò)程中不受損壞，并在搬遷后能夠迅速恢復(fù)工作，為醫(yī)療機(jī)構(gòu)提供持續(xù)、可靠的檢測(cè)服務(wù)。